近期，隨著經(jīng)濟的復蘇，維生素類飼料添加劑銷售量大大增加，全球原料藥大制造商帝斯曼最近也宣布對飼料維生素A漲價6%，所以飼料中維生素A的檢測就顯得非常緊急和重要。
賽智科技參考國標（GB/T 17817-2010），利用全新高性能的LC-10Tvp高效液相色譜儀，經(jīng)實踐檢測可提供飼料中維生素A的HPLC檢測方案，得出的結果準確可靠，檢出限好，適用于配合飼料、濃縮飼料、復合預混合飼料、維生素預混合飼料中維生素A的測定，方案僅供參考。
以下是維生素A的測定的詳細檢測方法。
1、儀器與試劑
1.1 儀器
LC-10Tvp高效液相色譜儀
Vertex 色譜柱：150mm×4.6mm×5μm；
分析天平，感量為分別為0.001g，0.0001g，0.00001g；
圓底燒瓶，帶回流冷凝器；
恒溫水浴鍋；
旋轉蒸發(fā)器；
超純水器。
1.2 試劑
無水乙醚：不含過氧化物；
無水乙醇；
正己烷，色譜純；
異丙醇，色譜純；
甲醇，色譜純；
2,6-二叔丁基對甲酚（BHT）；
無水硫酸鈉；
氮氣（純度99%）；
碘化鉀溶液；
淀粉指示液；
硫代硫酸鈉溶液；
氫氧化鉀溶液；
L-抗壞血酸純品；
酚酞指示劑；
1,4-二氧六環(huán)；
維生素A乙酸酯標準品：含量≥99%；
維生素A標準貯備液；
維生素A標準工作液。
2、試樣溶液的制備
2.1 皂化
稱取試樣配合飼料或濃縮飼料適量，置入圓底燒瓶中，加L-壞血酸乙醇溶液，使試樣完全分散、浸濕，加氫氧化鉀溶液，混勻，置于水浴上回流，不時震蕩防止試樣粘附在瓶壁上，皂化結束，分別用無水乙醇、水自冷凝管頂端沖洗其內部，取出燒瓶冷卻至40℃。
2.2 提取
定量轉移全部皂化液于盛有無水乙醚的分液漏斗中，用蒸餾水分2次~3次沖洗圓底燒瓶并入分液漏斗，加蓋、放氣，隨后混合，激烈震蕩，靜置、分層。轉移水相于第二個分液漏斗中，分次用乙醚重復提取兩次，棄去水相，合并三次乙醚相。用蒸餾水多次洗滌乙醚提取液至中性，初次水洗時輕輕旋搖，防止乳化。乙醚提取液通過無水硫酸鈉脫水，轉移到棕色容量瓶中，加BHT使之溶解，用乙醚定容至刻度。以上操作均在避光通風柜內進行。
2.3 濃縮
從乙醚提取液中分取一定體積置于旋轉蒸發(fā)器燒瓶中，在水浴溫度約50℃，部分真空條件下蒸發(fā)至干或用氮氣吹干。殘渣用甲醇溶解并稀釋，離心或通過0.45μm過濾膜過濾，用于高效液相色譜儀分析。以上操作均在避光通風柜內進行。
3、色譜條件
色譜柱：VertexC18（4.6 mm×250 mm×5 μm）
流動相：甲醇：水=98:2
流速為：1.0mL/min
進樣量：20μL
檢測波長為：326 nm
柱溫：35 ℃
4、色譜圖
致力于為客戶提供全方位、高效可靠的色譜分析服務
