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兩種儀器pk—高效液相色譜儀與高效毛細管電泳儀

2025.04.23 賽智科技

高效毛細管電泳儀(HPCE)是以毛細管為分離通道,以高壓直流電場為驅動力,利用荷電粒子之間的淌度差異和分配系數差異進行分離,是分析科學繼高效液相色譜儀之后的又一重大進展,使分析科學從微升級進入到了納升級水平,不僅使單細胞乃至單分子分析成為可能,也使蛋白質和核酸等生物大分子分析有了新的轉機。HPCE與高效液相色譜儀比較如下:

一、相同點:

1、檢測器:

HPCE和高效液相色譜儀均可采用紫外檢測器、熒光檢測器和電化學檢測器等。但由于HPCE采用在柱檢測,光路短,靈敏度和線性范圍都不如高效液相色譜儀。

2、定性和定量方法:

HPCE的定性和定量方法與高效液相色譜儀相同,采用出峰時間定性,峰面積或峰高定量。

3、柱效和分辨率:

HPCE的柱效和分辨率計算方法與高效液相色譜儀相同。

二、不同點:

1、分離原理:

(1)HPCE:基于組分在載體電解質中遷移速度的不同。

(2)高效液相色譜儀:基于組分在固定相和流動相之間分配系數的不同。

2、分離模式:

(1)HPCE:毛細管區帶電泳、毛細管膠束電動色譜、毛細管凝膠電泳、毛細管等電聚焦電泳和毛細管等速電泳等。

(2)高效液相色譜儀:正相色譜、反相色譜、離子交換色譜和凝膠色譜等。

3、分離柱:

(1)HPCE:小內徑毛細管柱內裝不同載體電解質。

(2)高效液相色譜儀:小內徑毛細管柱內裝不同固定相。

4、進樣方式:

(1)HPCE:電動進樣、壓力進樣和擴散進樣。

(2)高效液相色譜儀:微量注射器進樣、六通閥進樣和自動進樣器進樣。

5、進樣體積:

(1)HPCE:納升級。

(2)高效液相色譜儀:微升級。

6、溶質驅動方式:

(1)HPCE:以高壓直流電場為驅動力。

(2)高效液相色譜儀:以高壓輸液泵驅動流動相。

7、采用毛細管的目的:

(1)HPCE:有效散熱,使徑向溫度梯度更小。

(2)高效液相色譜儀:消除渦流擴散,縮短組分在流動相中的傳質過程。

8、柱效:

(1)HPCE:72萬TP/m,大分子更大,尤其生物大分子可達3000萬TP/m,能檢測到單細胞和單分子水平。

(2)高效液相色譜儀:一般為25TP/m,大分子更小。

9、柱價:

(1)HPCE:柱價低,

(2)高效液相色譜儀:柱價高,且易沾污,易失效。

10、分離液:

(1)HPCE:在水溶液介質中進行,不污染環境。

(2)高效液相色譜儀:常在含有機溶劑(如甲醇等)介質中進行,易造成環境污染。


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